兽医实验室生物安全手册【doc】

2020-11-26 03:47:45 本页面

【导读】实验室不可避免接触到病原生物、危险化学品和放射性物质。病性病原生物、病原微生物实验室操作的实验室安全管理是必不可少的。管理,从而达到全面降低实验室生物危害风险目的。成持续改进机制,不断提高实验室生物安全管理水平有非常重要的意义。参差不齐,相应的软硬件落后,实验室的实验活动不规范。因此,加强和规范我市。控能力的重要措施。是对实验室工作人员生命安全的保护。安全、同事安全、社会以及环境安全的责任心。了实验室生物安全的相关知识,对实验室的管理和建设有一定的参考价值。特别感谢所有对本册做出贡献的人们!



【正文】
XXX市动物疫病预防控制中心
实验室生物安全手册
RDF—D001
版号:第一版
修订状态:第0次修订
编制人员:
审批人:
受控状态:受控
受控编号:
持有人:
1
序言
实验室不可避免接触到病原生物、危险化学品和放射性物质。加强对从事高致
病性病原生物、病原微生物实验室操作的实验室安全管理是必不可少的。病原微生
物实验室的生物安全,事关重大动物疫病防控,事关实验室工作人员和社会公众的
健康。
本手册从鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心(以下简称市疫控中心)所进行的
实验操作和所拥有的仪器设备的实际为基础,根据相关法律法规为依据,通过科学
管理,从而达到全面降低实验室生物危害风险目的。对进一步完善实验室生物安全
管理组织,明确分工,落实责任,并进一步完善实验室内部生物安全控制体系,逐
步建立起有方案-目标-控制-评价-反馈-改进的闭合形生物安全管理体系,形
成持续改进机制,不断提高实验室生物安全管理水平有非常重要的意义。
目前,我市兽医实验室存在的主要问题是:实验室管理水平低,工作人员素质
参差不齐,相应的软硬件落后,实验室的实验活动不规范。因此,加强和规范我市
兽医实验室管理既是当前迫在眉睫的工作任务,同时也是全面提高我市动物疫病防
控能力的重要措施。
加强实验室生物安全建设和管理,不仅是对公众、环境和国家的安全负责,也
是对实验室工作人员生命安全的保护。要想有一个安全和健康的实验室环境所有的
实验室人员必须经过良好的培训并具备熟练的安全操作技术,同时也要具有对自身
安全、同事安全、社会以及环境安全的责任心。
本册以近期国务院颁布的《病原微生物实验室生物安全管理条例》和国家标准
GBl9489—2020《实验室生物安全通用要求》为基准,参阅了国内外大量的权威文
献。其内容包括“实验室生物安全管理体系”、“实验室生物安全基本原则”、“生物
安全实验室”、“实验室生物安全操作技术规范”、“实验室危害”、“实验室生物安全
培训程序”、“安全清单”和“实验室质量管理体系概述”等八个部分;全面地介绍
了实验室生物安全的相关知识,对实验室的管理和建设有一定的参考价值。其中重
点讲述了“生物安全实验室”和“实验室生物安全操作技术规范”两个部分。由于
时间比较仓促,加上本人水平有限,其中难免会有错误和漏洞,希望读者给予批评
和指正。
特别感谢所有对本册做出贡献的人们!
主编:
二〇一一年六月
居安思危除隐患预防为主保安全
2
目录
序言.........................................................................1
总则.......................................................-1-
第一章实验室生物安全管理体系..................................-3-
一、目的....................................................................-3-
二、适用范围...............................................................-3-
三、紧急事件电话和办公室联系方式.........................................-3-
四、组织机构...............................................................-4-
五、市疫控中心的生物安全管理体系结构框....................................-8-
第二章生物安全评估和管理....................................-9-
一、风险评估和风险管理表..................................................-9-
二、暴露途径...............................................................-9-
三、生物安全等级..........................................................-12-
四、生物安全评估..........................................................-13-
五、生物安全检查制度......................................................-15-
第三章实验室管理制度.......................................-17-
一、实验室准入制度........................................................-17-
二、实验室日常管理制度....................................................-17-
三、实验室安全管理制度....................................................-18-
四、实验室人员培训、考核制度.............................................-19-
五、实验室人员健康医疗监护制度...........................................-20-
六、病原学实验室管理制度..................................................-21-
七、原始记录填写制度......................................................-22-
八、档案管理制度..........................................................-23-
九、仪器管理制度..........................................................-24-
十、有毒药品、菌(毒)种保存管理制度.....................................-24-
十一、个人防护用品有关规定...............................................-25-
十二、实验室洗涤、消毒制度...............................................-26-
十三、废弃物处理制度....................................................-27-
十四、实验室生物安全工作监督制度.........................................-28-
十五、病原微生物菌(毒)种、样本的接收、保藏、使用和销毁管理规定.......-29-
第四章实验室生物安全操作规范.................................-32-
一、一级生物安全实验室操作规范..........................................-32-
二、二级生物安全实验室操作规范..........................................-32-
第五章实验室标准操作规程....................................-35-
第一节、生物安全实验室防护屏障...........................................-35-
3
一、警示标识.................................................-35-
三、设施和设备...............................................-36-
四、个人防护装备的总体要求...................................-37-
五、BSL-2实验室人员进出实验室要求...........................-38-
第二节样品检测规程.......................................................-40-
一、实验室检测样品采集规程...................................-40-
二、实验室检测样品包装和运送规程.............................-42-
三、实验室检测样品接收规程...................................-43-
四、样品检测操作规程.........................................-44-
第三节仪器设备操作规程..................................................-44-
一、移液管和移液辅助器的使用.................................-44-
二、高压灭菌器的使用.........................................-45-
三、接种环的使用.............................................-45-
四、生物安全柜的使用.........................................-45-
五、超净台使用说明...........................................-46-
六、离心机的使用.............................................-47-
七、恒温箱的使用.............................................-47-
八、显微镜的使用.............................................-48-
九、普通冰箱(冰柜)使用、清洁与消毒...........................-48-
十、匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器的使用...................-49-
十一、电热干燥箱的使用.......................................-49-
十二、注射器及玻璃器皿的使用.................................-50-
十三、超高速冷冻离心机操作程序与注意事项.....................-50-
十四、PCR基因扩增仪的使用....................................-51-
十五、电泳仪的使用...........................................-52-
十六、凝胶成像仪使用注意事项.................................-53-
第六章消毒和灭菌...........................................-54-
一、定义...................................................................-54-
二、实验室材料的清洁......................................................-55-
三、化学杀菌剂............................................................-55-
四、清除局部环境的污染....................................................-59-
五、清除生物安全柜的污染..................................................-59-
六、洗手/清除手部污染....................................................-60-
七、热力消毒和灭菌........................................................-60-
八、高压灭菌..............................................................-60-
九、高压灭菌器的装载......................................................-60-
十、焚烧...................................................................-61-
十一、废弃物处理..........................................................-61-
十二、常用消毒标准操作规程................................................-61-
第七章危害性物质管理规则.....................................-67-
居安思危除隐患预防为主保安全
4
一、危害性物质的储存......................................................-67-
二、危害性物质的毒性作用..................................................-67-
三、爆炸性危害性物质......................................................-67-
四、危害性物质溢出........................................................-68-
五、火的危害..............................................................-68-
六、电的危害..............................................................-70-
七、噪声...................................................................-71-
八、电离辐射..............................................................-71-
九、电离辐射保护原则......................................................-71-
第八章实验室感染应急处置预案.................................-73-
一、目的...................................................................-73-
二、适用范围..............................................................-73-
三、职责...................................................................-73-
四、实验室感染事件分级、判定和解除.......................................-73-
五、紧急事件的处理办法....................................................-75-
六、实验室感染的现场调查控制.............................................-77-
七、实验室感染监测与报告..................................................-79-
八、实验室感染的预防......................................................-81-
九、督察和责任追究.......................................................-82-
第九章安全排查清单.........................................-85-
一、实验室建筑............................................................-85-
二、储存设施..............................................................-85-
三、环境卫生和工作人员设施...............................................-86-
四、暖气和通风............................................................-86-
五、照明...................................................................-86-
六、保养...................................................................-87-
七、实验室生物安全保障....................................................-87-
八、防火与消防............................................................-87-
九、易燃液体的储存........................................................-88-
十、电的危害..............................................................-89-
十一、个体防护............................................................-89-
十二、工作人员的健康与安全...............................................-89-
十三、实验室仪器设备......................................................-90-
十四、感染性物质..........................................................-90-
附表.........................................................93
附表一、生物安全会议记录.............................................93
附表二、实验人员生物安全定期培训记录.................................94
附表三、生物安全检查记录表...........................................95
5
附表四、实验室生物安全事故处理记录表.................................96
附表五、实验室废弃物处理记录表.......................................97
附表六、生物危害评估记录表...........................................98
附表七、违反生物安全工作登记表.......................................99
附表八、纠正和预防措施报告..........................................100
附表九、实验室内务监督检查表........................................101
附表十、实验室室消毒记录表..........................................102
附表十一、消防系统的维护、检验记录表................................103
附表十二、冰箱/冰柜温度记录表.......................................104
附录:........................................................................105
XXX市动物疫病预防控制中心
XXXAnimalDiseaseControlCenter
-1-
总则
一、目的
为确保本实验室全体员工熟悉生物安全法律、法规,建立生物安全意识,保证
相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术,避免实验室感染,防止实
验室事故,特制定此手册。
二、依据
《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《医疗废物管理条例》、《实验室生物
安全通用要求》、WHO《实验室生物安全手册》、《生物安全实验室建筑技术规范》、《动
物病原微生物菌(毒)种保藏管理办法》、《兽医实验室生物安全管理规范》、《病原
微生物实验室生物安全管理条例》。
三、生物因子生物危害评估
为保证本实验室工作人员在工作中不被危害性生物及物品所侵害,保证危害性
物品不外泄,对微生物实验室工作环境进行评估,以鉴定生物安全防护等级,保证
生物安全。根据《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2020),因我实验室只进
行动物疫情监测和二、三类病原微生物限度检查及控制菌(大肠埃希菌)的检查,
评估仅有一般危险性,能够引起人类或者动物疾病,但一般情况下对人、动物或者
环境不构成严重危害,传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备
有效治疗和预防措施的微生物。评估我实验室为生物安全防护水平为二级
四、适用范围
适用于本兽医实验室所有工作人员。
五、相关文件
国务院《病原微生物实验室生物安全管理条例》
国务院《医疗废物管理条例》
《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2020)
居安思危除隐患预防为主保安全
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《生物安全试验室建筑技术规范》
《动物病原微生物分类名录》
《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》
WHO《实验室生物安全手册》第三版(2020)
6、修订
国家及农业部门涉及生物安全的法律法规发生修订更改时,本手册应相应作出
修订。
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-3-
第一章实验室生物安全管理体系
一、目的
建立兽医实验室生物安全体系,使之有效运行,明确相关部门及实验室人
员职责,落实实验室生物安全管理责任制,做到权责统一。
二、适用范围
适用于与本实验室实验活动相关的科室和人员。
三、紧急事件电话和办公室联系方式
救护车/火警/警察120/119/110
办公室电话:0477-8502777
实验室平面图、紧急出口、撤离路线:(见图1-1)。
图1-1实验室平面布局图
居安思危除隐患预防为主保安全
-4-
四、组织机构
生物安全管理实行中心主任责任制。
中心主任组织并授权生物安全领导小组负责生物安全工作,同时委派一名
中心副主任具体主管;成立生物安全领导小组;相关科室的主任应对所辖科室
的生物安全工作承担相应的领导责任。科负责人或项目负责人负责科室或具体
项目的运行管理;各级人员应认真阅读、理解本手册,并在相关实验活动中严
格遵守,在发生生物安全隐患、意外事件或事故时应及时报告。办公室、质管
办等管理部门对责任范围内的生物安全工作进行监督检查;其他相关职能部门
对生物安全体系的运行提供所需保障。实验室设置专职或兼职安全监督员。
生物安全管理机构
实验室生物安全管理工作领导小组及办公室人员
组长:XXX市农牧业局副局长、市兽医局局长电话:XXX
副组长:XXX市动物疫病预防控制中心主任电话:XXX
XXX市动物疫病预防控制中心副主任电话:XXX
XXX市动物疫病预防控制中心副主任电话:XXX
成员:XXXXXX
生物安全专家委员会人员及职责
主任委员:XXX市动物疫病预防与控制中心副主任电话:XXX
成员XXXXXX
生物安全负责人:XXX(疫控中心主任)电话:XXX
实验室安全管理负责人:XXX电话XXX
实验室生物安全管理负责人:XXX电话:XXX
诊断室实验室负责人:XXX电话:XXX
疫情监测管理负责人:XXX电话:XXX
实验室技术人员及实验活动辅助人员:
XXXXX
:XXXX电话:XXXX
实验室生物安全管理工作领导小组
领导小组是本实验室生物安全管理工作领导决策机构,其主要职责是:
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-5-
负责实验室生物安全组织管理、协调指挥及重大事项决策。
负责收集汇总兽医实验室设立、分布及高致病性病原微生物实验室工作情况。
及时将有关情况报告领导小组。
组织进行实验室生物安全管理工作的调查和监督检查。
组织制定实验室生物安全技术方案。
组织进行全市人员培训和师资培训。
生物安全专家委员会
专家委员会负责为市领导小组提供实验室生物安全管理的情报信息、技
术、装备、资料库建设等决策的咨询意见;
负责针对现场紧急处置、救援、检疫鉴定、区域划分、洗消防护、危害
评估和事后恢复等问题进行研究,提出指导和评估意见;
负责对实验室生物安全相关科学研究进行指导和评估;参与实验室生物
安全相关技术方案、培训教材审定和人员培训工作。
生物安全负责人
市疫控中心主任指定分管实验室中心副主任为具体生物安全负责人。生物
安全负责人的主要职责是:
对生物安全负总责;
负责建立本单位生物安全管理体系,落实生物安全管理责任部门或责任人。
定期召开生物安全管理会议,对实验室生物安全相关的重大事项作出决定。
批准和发布实验室生物安全手册、生物危害评估等重要文件。
保持与生物安全办公室的联系。
实验室生物安全科责任人
各专业实验室主任为实验室生物安全责任人,其主要职责是:
负责组织制(修)订和实施实验室生物安全手册、生物安全规章制度、
操作规范和标准操作规程。
负责组织对涉及的生物因子、使用动物、重组DNA以及基因修饰物质的
研究方案进行审查和风险评估。
负责对本实验室生物安全防护,微生物菌(毒)种和生物样本保存和使
用,实验室安全操作,实验室废气、废水、废弃物处置和消毒灭菌等规章制度
实施情况进行监督、检查,并定期评估实施效果。
居安思危除隐患预防为主保安全
-6-
负责组织跟踪国际国内实验室生物安全管理最新动态。提供实验室操作
的咨询以确保遵循国家相关的标准。
负责定期调查、了解实验室工作人员的健康状况和健康监护情况。决定
必要的特殊医学监测。
组织生物安全知识培训并评估培训效果。
指导基层疫控中心开展相关实验室生物安全工作。
诊断实验室负责人
负责实验室的日常管理、实验技术和生物安全工作;
组织生物安全防护知识和有关法规、制度、规程的宣贯;
组织相关人员按要求进行培训、考核、体检和预防接种;
决定进入实验室的工作人员;
加强人员的生物安全防护,牢固树立安全意识,建立实验室生物安全制
度,保证相关上岗人员在场安全防护技能上得到培训。持生物安全证上岗。
监督有关法规和操作规程的执行,纠正出现的违规活动并有权停止实
验;
定期组织对实验室设备各项技术参数的检查和实验室装备的维护保养;
负责实验室紧急情况及事故的处理并向生物安全领导小组报告;
疫情监测管理科负责人
负责实验室生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作。
就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定期的内部安全检查。
纠正违反生物安全操作规程的行为。
在出现潜在感染性物质溢出或其他事故时,协助事故调查。
检查和监督实验室废弃物的有效管理与安全处置。
检查和监督实验室各项消毒灭菌措施的落实情况。
实验室技术人员及实验活动辅助人员
实验室技术人员必须严格遵守实验室生物安全管理制度,按规定接受培
训、考核、体检和预防接种;
现场标本的采集、运送过程中,做好人员的防护和标本的密闭包装,并
及时送达相关实验室检测;
病原检测工作在相应生物安全等级的实验室进行,保持良好的内务行
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为,并及时做好废弃物处置和记录;
严格按规范做好菌种标本分类保存和记录工作,执行双人双锁和专室存
放制度。经批准向上级机构上送菌株应符合相应的安全规定,并遵守国家关于
道路、铁路和水路运输危险材料的有关要求;
按要求执行标准操作规程和仪器设备操作规程,做好实验记录;
按规程进行常规消毒和意外事件紧急处理;
发现生物安全隐患或发生事故及时向有关上级报告;
参与相关工作的危害评估及生物安全事故认定与处置。
安全监督员
有权力监督实验室制度、操作规程的实施,发现不符合规定的行为或安全
隐患有权要求有关人员进行纠正;对于发现的严重问题及时向实验室主任报告
或直接向生物安全领导小组报告;做好监督记录。
居安思危除隐患预防为主保安全
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五、市疫控中心的生物安全管理体系结构框
图1-2生物安全管理体系结构框图
安全监督员疫情监测管理科诊断试验室
实验室
相关职能科室相关业务科室后勤保障部门
生物安全管理科
办公室
中心主任
中心副主任
(生物安全负责人)
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第二章生物安全评估和管理
在建设实验室或开展实验活动之前,生物安全办公室应参照卫生部《名录》组
织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶
传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、应急预案的有效性等因素
进行评估,确定相应的生物安全防护水平等级。
实验室生物危害评估结果应由中心的法定代表人签字认可,并归档保存。
生物安全负责人最终对实验室内的安全负责,其职责之一是指导现行工作以判断
潜在的危害(生物安全评估),职责之二是实验开始前采用合适的安全程序(风险管理)。
特定的实验开始前需要预先进行登记和通过生物安全负责人的批准。
风险评估和风险管理的5个“P”是指:
Pathogen病原体–危险的生物因子
Procedures规程–推荐的实验操作和安全的操作规范
Personnel人员–相应的培训与技能
Protectiveequipment防护设备–防护衣和安全设备
Place地点–实验室所在位置
实验室工作的每一方面都应考虑风险评估和风险管理的5个“P”。正确地指导和
风险评估能帮助免受生物危害的暴露,以及最大程度减少实验室受到感染的可能性。
一、风险评估和风险管理表(见表2-1)
二、暴露途径
生物因子要导致疾病发生,首先必须有足够数量的因子进入或侵入人体,进入
的途径有经口、呼吸道、黏膜及与动物的接触(叮、抓伤),当生物危害物进入人
体,它产生疾病还需满足其它条件,它们必须在人体细胞、组织和/或器官内生长
繁殖,克服人体的自然免疫机制和变异或适合人体的变化。
年龄、免疫状况、职业、物理或地理环境等因素会导致个体对疾病的不同易感性。
在涉及生物危害时,确定其最低感染量是很困难的。同一病原体相同剂量在一
个人身上可能无症状,而在另一人身上可能导致严重的症状甚至致命。有些微生物
只要一个进入到人体就足以侵入并促使疾病的发生,结核杆菌就是一个例子。暴露
居安思危除隐患预防为主保安全
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途径的更多信息(见表2-2)。
表2-1风险评估和风险管理表
风险评估风险管理
病原体
传染因子类型(见表2-4)
感染途径
感染性疾病发生过程
病毒性、致病性、数量、浓度、人群
中影响程度、昆虫媒介的存在
登记
生物安全办公室
感染机构
约束机构
疫控中心–选择机构
规程
气溶胶风险:超声、离心、混匀、
混合、振动
经皮风险:针头、注射器、玻璃吸
液管、解剖刀、低温刀片/刀等
飞溅/溅泼风险:吸液管、接种环
建立一套结合安全使用的标准操作规程
遵守基本的生物安全规则
实验室、工作区域、BSL-2或更高
传染因子实验室内的设备贴上标识
指导实验室操作和检查实验设备
用非传染性材料做尝试性试验,以测
试新的规程/设备
人员
人员免疫
赘生物疾病
感染
免疫抑制治疗
年龄、种族、性别、妊娠
手术(脾、胃切除)
免疫力
后暴露预防
血清库
对安全的态度
安慰
外伤、破损皮肤、湿疹、皮炎
安全培训
以前从事生物危害的经历
技术的熟练程度
立即向生物安全负责人和生物安全
办公室报告所有的暴露事件、被忽视
的事件以及相关疾病的症状
调查/核实事件/飞溅等,以防止再
次发生
防护设备
防护:
气溶胶-可以吸入粒子直径5181。m
飞溅/溅泼
锐器
个人防护设备(PPE):
口罩–HEPA,N-99,N-95,等
面部(眼、鼻、嘴)防护-面具和安
全眼镜、或盖住下颌的面罩、前面
无缝外衣或实验室外衣
手套
生物安全柜
安全离心管/转子
地点
风险组/生物安全等级、设备
气溶胶风险
受限制的过道
基本的实验室-门、易清洁的地方、
冲眼器、窗户
标签
用直接气流预防
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表2-2实验室内传染因子的传播途径
暴露途径防护措施
黏膜:通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、
嘴里的黏膜
通过以下方式进行面部的预防:
戴护眼镜或面罩
在生物安全柜内或保护罩后工作
进行规范的微生物操作
吸入:由于离心渗漏、溢出或产生
气溶胶的操作如吸液、混匀等而吸
入了可吸入的气溶胶粒子(直径
5181。m)。
通过以下方式避免暴露气溶胶:
在生物安全柜内工作
离心时使用密封转子或杯
进行规范的微生物操作
吞咽:口腔吸入、吃、喝、在实验
室里抽烟
通过以下方式防止经吞咽产生的暴露:
不在实验室内吃、喝或吸烟
始终使用手工吸液
进行规范的微生物操作
经皮:被感染过的锐器刺伤完好或破损
皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹
通过以下方式防止皮肤破损:
用塑料制品代替玻璃制品
使用锐器要非常小心
用后立即将锐器丢弃在坚固防漏容器内
适当限制动物
戴不易划破的手套、袖套、
用防水绷带包扎好破损皮肤并戴双层手套
接触(间接传播):通过接触污染面
(如凳、电话、电脑、设备把手等)
的手来触摸黏膜或破损皮肤,或实验
后洗手不彻底。
通过以下方式防止间接暴露:
工作台面消毒
工作后、脱去手套后总是洗手。
不要用戴手套或不戴手套的手触摸脸部(良
好的个人习惯)
实验室内不使用化妆品。
在实验室内的任何时候始终执行以下工作制度:
不在实验室内吃、喝或吸烟
工作结束后或脱去手套后总是洗手
实验室内穿戴好个人防护设备,离开实验室前务必脱去个人防护设备
不用口吸、始终用手工吸液
使用锐器格外小心
用合适的设备抑制气溶胶的产生
居安思危除隐患预防为主保安全
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对工作台面、溢出物和废弃物进行消毒
三、生物安全等级
国家和卫生部、农业部门对微生物和生物医学实验室确立了从事生物危害
工作对应的生物安全等级。提供了微生物操作、实验室设备和安全设施的结合
使用,以及所选的感染因子与使用推荐的四种生物安全等级的实验室操作。
以下是1-4级生物安全所要求的实验室操作、防护设备、实验室设施和传
染因子的概括(见表2-3)。
表2-3推荐的生物安全等级与相应感染因子
生物安
全等级感染因子规程
安全设备
(第一道屏障)
实验室设备
(第二道屏障)
BSL-1
已知对健康成人
和动物不造成疾
病。
标准微生物操
作。
不需要。开放工作台。
防止节肢动物和啮齿
动物进入。
实验室靠近出口处有
洗手池。
实验室的窗户有纱窗。
适当的消毒设备。
BSL-2
能引起人或动物发
病,但一般情况下对
健康工作者、群体、
家畜或环境不会引起
严重危害的病原体。
实验室感染不导致严
重疾病,具备有效治
疗和预防措施,并且
传播风险有限。
BSL-1操作加:
限制进入
生物危害
警示标记
锐器谨慎
使用
制定安全
手册,确定
所有废物
消毒和医疗监
督计划
I级orII级生物安
全柜或其它物理防护
设备,这些设备应用
于可能会产生飞溅或
气溶胶的感染因子的
操作;个人防护设备:
外套、手套、所需要
的面部防护
BSL-1加:
实验室门应带锁并可
自动关闭。
供应、排放真空系统
BMBL上的应设洗眼设
施、高压灭菌锅。
BSL-3
能引起人或动物严重
疾病,或造成严重经
济损失,但通常不能
因偶然接触而在个体
间传播,或能用抗生
素抗寄生虫药治疗的
病原体。
BSL-2操作
加:
控制进入
所有废弃
物消毒
实验室衣
服洗之前对
其进行消毒
II级(B2)或Ⅲ级生
物安全柜和用于所有
感染因子操作的其它
物理防护设备;个人
防护设备:防护衣、
手套、需要的呼吸道
防护。清洁区设置淋
浴装置。
BSL-2加:
自成隔离区,进入实验室
的过道用物理方式隔开。
入口处采用自动关闭
双层门。
独立的送排风系统,空气
排至室外,不在室内循环。
实验室负压
实验室污染区内设不排
蒸汽的高压蒸汽灭菌器。
BSL-4
能引起人或动物非常
严重的疾病,一般不
能治愈,容易直接、
间接或因偶然接触在
人与人,或动物与人,
或人与动物,或动物
与动物之间传播的
BSL-3操作加:
进入实验
室前更衣
出口处冲淋
所有材料
在出口处消

按照Ⅲ级生物安全的
所有步骤进行,全身
穿上有空气供应系
统、正压个人防护衣。
BSL-3加:
远离建筑物或单独的
区域
安装
其它需求
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-13-
病原体。
根据国家标准GB19489-2020《实验室生物安全通用要求》编制。
四、生物安全评估
生物因子危害评估
目前实验室内主要开展的病原体检测的范围及检测方法为(见表2-4):
表2-4本实验室主要开展的检测项目
疫病种类项目/参数检测标准(方法)名称及编号(含年号)
口蹄疫
抗体检测,液相阻断ELLSA试验
正向间接凝集试验;病原学检测:
非结构蛋白ELLSA试验
《口蹄疫诊断技术》
(GB/T18935-2020)
高致病性禽
流感
抗体检测,红细胞凝集抑制试验
病原学检测:金标法
《红细胞凝集抑制试验》
(GB/)
鸡新城疫抗体检测,红细胞凝集抑制试验病原学检测:金标法《新城疫检疫技术规范》(GB16550-1996)
猪繁殖和呼
吸综合症
抗体检测,ELLSA试验《猪繁殖和呼吸综合症诊断方法》
(GB/T18090-2020)
猪瘟抗体检测:正向间接凝集试验病原学检测:ELLSA试验《猪瘟诊断技术》(GB16551-2020)
猪丹毒血清培养凝集试验《猪丹毒诊断技术》(NY/T566-2020)
猪链球菌病定型PCR反应《猪链球菌2型PCR定型检测技术》(GB/T)
鸡白痢细菌分离与鉴定《鸡白痢沙门氏菌检验》(GB/)
鸡马立克氏病疫病监测,琼脂扩散试验《鸡马立克氏病诊断技术》(GB/T18643-2020)
禽曲霍菌病病理学检查,病原学检查《禽曲霍菌病诊断技术》(NY/T559-2020)
禽霍乱临床诊断,病理剖检,病原分离鉴定《禽霍乱(禽巴氏杆菌病)诊断技术》(NY/T563-2020)
猪旋毛虫病病原分离与鉴定,压片镜检《猪旋毛虫诊断技术》(GB/T18642-2020)
猪囊尾蚴病病原分离与鉴定,ELLSA试验《猪囊尾蚴病诊断技术》(GB/T18644-2020)
居安思危除隐患预防为主保安全
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棘球蚴病病原分离与鉴定,IHA,ELLSA试验《动物棘球蚴病诊断技术》(NY/T1466-2020)
猪水泡病反向间接血凝,琼脂凝胶免疫扩散试验《猪水泡病诊断技术》(GB/T19200-2020)
副结核病皮内变态反应试验《副结核病诊断技术》(NY/T539-2020)
狂犬病抗体检测,ELLSA试验狂犬病诊断技术(GB/T18639-2020)
猪巴氏杆菌病临床诊断,病理剖检,病原分离鉴定《猪巴氏杆菌病诊断技术》(NY/T564-2020)
猪丹毒临床症状观察,病原分离和鉴定《猪丹毒诊断技术》(NY/T566-2020)
结核病细菌学,变态反应试验《动物结核病诊断技术》(GB/T18645-2020)
布鲁氏菌病平板凝集,试管凝集试验《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T18646-2020)
炭疽细菌学、沉淀试验《动物炭疽诊断技术》(NY/T561-2020)
球虫病病原检查,病理检查《动物球虫病诊断技术》(GB/T18647-2020)
马鼻疽鼻疽菌素点眼试验《马鼻疽诊断技术》(NY/T557-2020)
羊痘诊断、检疫、临床检查《绵羊痘和山羊痘诊断技术》(NY/T576-2020)
蓝舌病诊断、检疫、临床检查《蓝舌病诊断技术》(GB/T18636-2020)
马流产沙门
氏菌病
诊断、检疫、细菌学检查《马流产沙门氏菌病诊断技术》
(NY/T570-2020)
痒螨、疥螨病原检查,病理检查《羊螨病诊断技术》(NY/T1470-2020)
牛羊胃肠道
线虫病原检查
《牛羊胃肠道线虫检查技术》
(NY/T1465-2020)
弓形虫病原检查,间接血凝试验《弓形虫病诊断技术》(NY/T573-2020)
根据上述我中心实验室可开展病原体检测能力的表格,所开展得工作为动
物疫病的血清学检测和低致病动物疫病病原学检验。我中心实验室环境设施设
备操作及防护水平符合生物安全二级实验室的标准,评估我中心实验室生物安
全级别为二级。本中心的实验室仅仅允许在生物安全等级为BSL-1和BSL-2的生物
因子在实验室里工作。
其它危害风险评估
此外,除考虑特定生物因子固有的致病危害外,风险评估还应包括:
物理、化学、电气风险
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人员相关风险(身体状况、能力、影响工作的压力等)
设备、设施的风险
意外事故/事件(水灾、火灾、地震、冰冻等)带来的风险
实验动物的风险
清洁剂、消毒剂的风险
五、生物安全检查制度
为确保实验室生物安全制度、措施落实到位,避免生物安全事故,特制订
本制度。
主任每年至少组织一次生物安全全面检查,对关键控制点可根据风险
评估报告适当增加检查频率。检查内容包括:
生物安全管理体系、实验室活动运行情况;
生物安全管理制度是否完善、是否落实;
实验室设施、设备和人员的状态;
应急装备、消防装备、报警体系和撤离程序功能及状态是否正常;
危险物品如可燃易燃性、传染性、放射性以及有毒物质的防护、控制情
况;
废物处理及处置情况;
不符合规定的工作是否及时得到纠正;h)现有资源能否满足工作要求
等。
科室负责人负责实验室生物安全的全面管理,检查、督促生物安全监督
员工作,每季度进行科室生物安全工作检查。检查内容包括:
生物安全监督员工作记录;
菌(毒)株、样本的运输、保存、使用、销毁情况;
生物安全实验室的消毒和灭菌情况以及感染性废物的处理情况;
生物安全设备的运行、维护情况;
防护物资的储备情况等。
生物安全监督员负责实验室日常工作的生物安全监督、检查。检查内容
包括:
生物安全管理制度执行情况;
居安思危除隐患预防为主保安全
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个人防护要求执行情况;
实验室人员的生物安全操作是否规范等;
及时发现、纠正违规行为,避免生物安全事故发生。
对于检查中发现的问题及时纠正,必要时制定纠正措施或实施整改,
并进行跟踪验证。
按照资料、档案管理制度保存所有检查记录,及时归档。
将自查发现的问题作为实验室生物安全培训计划解决。
为保证检查工作的质量,应依据事先制定的适用于不同工作领域的检
查表实施检查。
当发现不符合规定的工作、发生事件或事故时,应立即查找原因并评
估后果;必要时,停止工作。
生物安全委员会应参与安全检查。
外部的评审活动不能代替实验室的自我安全检查。
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第三章实验室管理制度
一、实验室准入制度
目的:规范实验室秩序,保障实验室工作安全开展,使危害风险可控。
范围:适用于实验室所有工作人员。
职责:生物安全负责人负责实验室人员日常工作的组织实施。
1.单位法人负责组织专门的领导小组和生物安全委员会负责生物安全,制
定管理制度,监督有关法规和操作规程的执行。
2.实验室主任有权决定本部门进入实验室的工作人员。孕妇、不健康者
和无关人员不得进入实验室。
3.参加实验动物的人员,必须持有《实验室从业人员岗位证书》。
4.所有参加实验的人员必须进行实验室操作培训,对其操作规程、生物
安全防护知识和实际操作技能进行考核,方可上岗。
5.在房门上应有国际通用的生物危害警告标志,有实验室名称、病原体
名称、生物危害等级、负责人姓名、联络方式等有关信息。
6.只有经批准的人员方可进人实验室工作区域;儿童不应被批准或允许
进入实验室工作区域;与实验室工作无关的动物不得带人实验室。
7.实验室的门应保持关闭。进入动物房应当经过特别批准。
8.进入从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室的工作人员或者
其他有关人员,应当经实验室主任批准。并为其提供防护用品。
9.实验区要保持卫生,每日清洁消毒,每周大扫除。工作人员做好个人
防护,每日洗澡更衣,接触污物后洗手。
10.新调入人员、外来合作、进修和学习的人员在进入实验室之前必须经
过实验室主任的批准。非实验室人员和非实验室物品不得进入实验室。
二、实验室日常管理制度
目的:规范实验室人员的日常工作,保障实验室工作正常有序开展。
范围:适用于实验室所有工作人员。
职责:诊断实验室负责人负责实验室人员日常工作的组织实施。
居安思危除隐患预防为主保安全
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、物品整理和贵重物品的使用、保管工作;及时做好
各种设备的维护工作。做到分工明确,责任到人。
2.实验室内应保持严肃、安静、整齐、清洁;禁止吸烟,禁止带入食物;
不准洗涤或晾晒衣物,不准与实验室无关的人员,包括亲属、小孩等进入。
3.做实验时必须身着工作服,实验中应认真负责,遵守各项操作规程,
及时做好记录,严禁擅自离开工作岗位。
4.工作时间不得私自会客、高声谈笑,非因工作需要不得进入其它实验
室,以免影响他人工作。
5.实验室内公用的药品、仪器、图书及用具应定点存放,用毕放回原处。
6.凡使用易燃易爆物品时,应加倍小心,严格按程序操作。
7.使用或试验有毒、有害气体时,应在毒气柜内操作;浓酸、浓碱或其
它有害废液应倒入废液缸内;检查细菌的用具用后应经灭菌处理。
8.使用精密、贵重仪器应严格操作,按要求做好登记手续。
9.每一实验完毕,必须及时关闭所用之水电,清洗用过的玻璃仪器等物
品。
10.凡晚间或假日需要使用实验室,须经实验室主任批准,并作好登记。
11.实验室应配备防火器材及其它相应设备,如过载装置、漏电保护装置
或烟雾探测器。
12.每日上下午下班离开实验室前,各实验室负责人或责任人应细心巡查
实验室内水电门窗及各种设备的运转情况,及时安排值班人员,以防发生事故。
13.各实验室负责人要布置安全工作。
14.操作者严格认真执行各项规章制度,严禁违章操作。防止污染、配
液错误、异物混入等事故的发生。
15.防止设备事故的发生,严格按设备安全操作规程进行操作。
16.事故的处理要采取有效措施,防止事故蔓延造成更大损失。
三、实验室安全管理制度
目的:为了保证实验室工作安全开展,增强实验室工作人员安全保护意识。
范围:适用于实验室所有工作人员。
职责:疫情监测管理科负责人负责实验室安全管理工作的组织实施。
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1.实验室疫情监测管理科负责人负责实验室安全工作,对实验室人员进行
各种危险物品的性质、使用要求及各种仪器设备的安全使用培训及有关中毒、
受伤急救措施的培训,做好个人防护。
2.实验室应保持实验台面、地面、各种仪器设备的干净、整洁。禁止在实
验室内大声喧哗、吸烟、饮食。实验操作时须穿戴工作衣、帽、手套。
3.生物安全柜、超净工作台应保持清洁,定期做熏蒸消毒处理。每次使用
前用紫外灯照射30分钟,使用后用70%酒精消毒台面,对实验废弃物进行消毒、
高压灭菌处理。
4.常规试验用过的培养基、试剂、试管、平皿、吸管等试验用品须经有效
的消毒处理后方可丢弃或清洗,按照《废弃物处理制度》执行。
5.由专人负责菌种、毒种的保存、繁殖、传代,按照《菌(毒)种及细胞
株(瘤)管理规定》做好各项工作。
6.每日上班后检查温箱、冰箱的工作情况,并建档记录温度升降情况。下
班前检查水、电、气、门、窗,确保安全。发现隐患,及时报主管领导。
7.在存放、操作菌种、毒种的设备上和有可能对工作人员健康造成危害的
地方加贴生物危害标志和安全提示语。
8.易燃、易爆、剧毒物品应严格按照《危险品管理规定》的各项要求执行。
9.实验室应配备适用于各种火灾的小型灭火器,中心所有工作人员都应学
会灭火器的使用方法,发现火灾及时报警。
四、实验室人员培训、考核制度
目的:为确保实验室人员熟悉生物安全法律、法规,建立生物安全意识,
保证相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术,避免实验室感染,
防止实验室事故。
范围:适用于实验室所有工作人员。
职责:生物安全管理科负责人负责实验室人员培训、考核工作的组织实施。
1.制定年度生物安全培训、考核计划。
2.培训内容:生物安全相关法律、法规、办法、标准、本实验室生物安全
手册、生物安全管理制度、应急预案、紧急事件的上报和处置程序、生物安全
风险评估、生物安全操作规范、仪器设备的使用、保养、维护、个人防护用品
居安思危除隐患预防为主保安全
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的正确使用、菌(毒)株及样本的收集、运输、保藏、使用、销毁、实验室的
消毒与灭菌、感染性废物的处置、急救等。
3.每年组织全员(包括实验室管理人员、技术人员、样本运送人员、保洁
员等)的生物安全培训、考核。
4.培训应该由取得自治区实验室生物安全师资培训合格证的人员进
行。
5.培训后应对参加培训的人员进行考核,考核形式可采取多样化,如笔试、
口试、实操等。
6.对考核合格的工作人员颁发相关岗位的上岗证。
7.建立并保存生物安全工作人员的培训、考核档案。
8.做好生物安全培训需求和效果的评估工作,为制定年度培训、考核计划
提供依据。
9.对新上岗、转岗的员工进行生物安全相关知识、生物安全手册等的培训,
明确所从事工作的生物安全风险。
10.进入实验室的外单位人员(包括进修、实习等工作人员)的由所在科
室,根据所从事工作的生物安全风险进行必要的生物安全培训,所有工作均在
带教老师指导下进行,学习期间不得从事危险性较高的工作。
11.当有关部门新颁发、修订生物安全相关法律、法规、规范、标准等,
实验室生物安全手册进行修改后应组织开展相关内容的培训和考核。
五、实验室人员健康医疗监护制度
目的:规范实验室人员的健康监护工作,预防、控制实验室感染。
范围:适用于实验室所有工作人员。
职责:安全监督员负责实验室人员健康监护工作的组织实施。
1.实验室人员体检制度
安全监督员应制定年度体检计划,报主管领导批准后由生物安全管理
科组织实施。体检情况应记入健康监护档案。
实验室技术人员要在身体状况良好的情况下从事相关工作,发生发热、
呼吸道感染、开放性损伤、怀孕等或因工作造成疲劳状态免疫耐受及使用免疫
抑制剂等情况时,需由实验室负责人同意从事相关工作,但不宜再从事高致病
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性病原微生物的相关工作。
安全监督员在批准外来学习、工作人员进入实验室前应了解其健康状
况,必要是可先行安排进行临时性体检,档案保留。
2.实验室人员免疫预防制度
实验室人员应根据岗位需要进行免疫接种和预防性服药,免疫接种时,
应考虑适应症、禁忌症、过敏反映等情况并记入健康监护档案。
对新从事实验室技术人员必须进行上岗前体检,体检指标除常规项目
外还应包括与准备从事工作有关的特异性抗原、抗体检测。不符合岗位健康要
求不得从事相关工作。
对体检结果异常的人员应随时进行必要的免疫接种或采取其他预防手
段,并记入健康监护档案。
发生实验室意外事件或生物安全事故后应根据需要进行必要的应急免
疫接种或预防性服药,并记入健康监护档案。
3.发生事故后的人员管理
发生实验室意外事件或一般生物安全事故后由检验科确定到相关门诊
救治,发现异常,由中心决定人员临时性或永久性调离岗位。临时调离岗位的
人员在重新上岗前必须进行体检,体检结果达到岗位健康要求后由检验科批准
其上岗。
发生重大生物安全事故后由检验科立即上报,同时采取有效措施尽量
控制人员感染范围。医学观察发现异常,由中心决定人员临时性或永久性调离
岗位,临时调离岗位的人员在重新上岗前必须进行体检,体检结果达到岗位健
康要求后由检验科批准其上岗。
六、病原学实验室管理制度
目的:为了保证病原学实验室工作安全开展,预防、控制实验室感染隐患。
范围:适用于实验室所有工作人员。
职责:诊断试验室负责人负责病原学实验室管理工作的组织实施。
1.病原学实验室的卫生管理除了达到实验室清洁卫生规程的全部要求以
外,还要达到本制度其它各项要求。
2.病原学实验室的门在任何情况下,均应及时关闭。进入病原学实验室
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的人员必须做到随手关门。
3.严格按《病原学实验室人员卫生管理制度》对人员进行管理。
4.病原学实验室内所用的各种器具、容器、设备、工具,需用不易发尘
及造成微生物污染的材料制作,并按规定程序进行清洁,方可进入洁净区。
5.应尽量减少使用不易清洗的带有凹凸面的橱柜和设施。
6.病原学实验室内不得使用铅笔、橡皮擦、记事板等。
7.操作生物安全柜时应严格按照操作程序使用。
8.在生物安全柜操作时应使室内保持正压。
9.每天必须有足够的时间用于清洁、消毒,变更试验时要保证有足够的
时间清场、清洁及消毒。
10.每年实验人员要定期体检,建立个人健康档案,体检合格者才能上岗;
患有传染病、精神病、外伤皮肤病及过敏等人员不能进入无菌室。
11.进出病原学实验室,要严格按更衣程序进行;洁净服、鞋专人专用,
不得混穿;不得穿离洁净区,洁净服、鞋等灭菌消毒后方可使用。
七、原始记录填写制度
目的:为了保证实验所得数据真实有效,为科学防控提供可靠依据。
范围:适用于实验室所有工作人员。
职责:实验室主任负责实验室记录填写工作的组织实施。
1.实验室各项记录包括:
设施和设备的使用、维护、保养、检修等记录。
物料验收、试验操作、检验、储藏记录。
物料退库和报废、紧急情况处理等记录。
实验室、无菌室及人员等卫生管理记录。
实验室、无菌室消毒及检验记录。
废物及污染物处理记录。
菌毒种领用、制备、保存、使用、销毁及运送记录。
生物安全技术培训及单位生物安全会议等记录。
2.填写记录必须真实、简明、完整、无缺页损角,有检验数据、计算式,
有检验者、复核者签字或签章(应写全名),字迹清晰,色调一致,采用钢笔书
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写,书写正确(如年月日不可写成215。/215。/215。),无涂改,若有写错时,划
上单线或双线,在旁边改正并签字或签章,有判定和依据,无漏项。记录本或
记录纸填写完应及时存入档案备查。
3.试验及检验结果分析数据和计算结果要求保留四位有效数字,弃去多余
的数字。
4.试验及检验结果的写法应与规定相一致。
5.试验及检验记录完成后,应由第二人对记录内容、计算结果进行复核,
复核的记录,属内容、计算错误,复核人要负责;属检验错误复核人无责任。
八、档案管理制度
目的:为了保证实验所得记录、档案长期保存,为科学防控提供可靠依据。
范围:适用于实验室所有工作人员。
职责:实验室主任负责实验室记录填写工作的组织实施。
1.在业务活动中形成的调查资料、录音、录像、事故处理文件、科研材料
以及贵重仪器说明书、基建图纸等,均应列入技术档案,统一管理。
2.档案工作由办公室负责收集、登记、积累、整理。业务技术资料,至年
终或专题工作结束时立卷归档。
3.档案划分为:绝密、机密、秘密和一般四类,永久保管和限期保管二种,
属限期保管的,到保管期限时重新审定。
4.参加会议带回的资料,应专门立卷,交办公室统一保管。
5.中心档案资料主要供本中心和上级主管部门利用。凡需使用,均须填写
文件调阅单,依据调阅权限和档案密级,经各级领导签批后方能调阅。
、资料必须填写《查阅档案登记表》。
7.档案、案卷一般仅供档案室阅看,原件一般不外借,立卷的文件、资料
可外借。外借时,须经主管领导或档案管理负责人批准;密级档案,特殊重要
的档案借出时,须经单位领导批准,借出时间不得超过三个星期,到期归还;
如需再借,应办理续借手续。
8.借阅者应爱护档案资料,确保档案的完整性,不得擅自涂改、勾画、剪
裁、抽取、拆散或损毁。特殊情况需涂改时应经相关领导同意,并在旁边签名。
借出的档案、资料要防止丢失、损坏,收回时要严格检查,发现遗失或损坏应
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及时报告主管领导。
9.外单位借阅档案,应持有单位介绍信,经中心主任批准后方可借阅,且
不得带离档案室,其抄稿内容也须经中心主任同意且审核后方能带出。
10.利用档案者有义务将利用档案资料产生的效果反馈到档案室,档案室
详细填写利用效果登记。
11.利用档案者必须遵守《中华人民共和国档案法》,未经主管或主管档案
工作领导批准,不得擅自公布档案。
九、仪器管理制度
1.所有仪器由专人负责管理共同使用,非专管人员使用需在专管人员指导
下进行,其他人员未经允许不得擅自使用。要充分发挥设备的使用率。
2.操作人员必须经过专门的技术训练,熟悉仪器的性能、用途、使用方法,
严格按照使用说明书的要求,遵守操作规程。
3.仪器使用过程中,应注意有无异常情况,如发生故障,必须及时查找原
因,尽快排除。遇有特殊情况,须立即报告,按具体情况进行处理。
4.建立管理档案,实行使用登记制度,并定期报告使用情况。
5.要定期检查保养维修,保证性能完好,防止由于保管不当造成损坏。
十、有毒药品、菌(毒)种保存管理制度
1.有关菌(毒)种和各类标准品的制备和检验的一切操作,应在空气净化
的密闭工作室内进行。不同菌(毒)种不得在同一室内同时操作,同种的强、
弱毒应分别在不同室内进行,并根据菌(毒)的生物安全级别注意操作人员的
防护。
2.本中心的菌(毒)种的保管采用双人双锁管理制度,菌(毒)种的出入
须两人经手。
3.各菌(毒)种应按类别分别保存于规定的条件下,存放的容器应加锁或
加封,并备有详细的分类清单,严防错乱,避免丢失。
4.各级菌(毒)种的保管应有严密的登记制度,建立总帐及分帐:并有详
细的各菌(毒)种登记卡片和档案。新收到的菌(毒)种,应立即进行登记,
注明收到日期、数量、生物安全级别及收到时菌(毒)种的状况,记载名称、
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株名、历史、来源、特性、用途、批号及传代日期等。
5.对菌(毒)种的使用,移植继代及其它工作,须经主管领导批准,并应
随时详细记录。不再使用的菌(毒)种应及时进行妥善处理;无保存价值的菌
(毒)种需淘汰时,须经本中心领导批准。销毁时,应有二人以上参加,并做
好登记。
6.索取、使用菌(毒)种时,应有实验室负责人和中心领导签字的《菌毒
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